肉毒杆菌核酸测定试剂盒（A/B/E/F型）
产品名称： 肉毒杆菌核酸测定试剂盒（A/B/E/F型）
英文名称： Botulinus（Types A/B/E/F）Real Time PCR Kit
产品编号： Rd-01
产品价格： 0
产品产地： 中国
品牌商标： Darwin
更新时间： null
使用范围： null
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肉毒杆菌（A/B/E/F型）核酸测定试剂盒（荧光PCR法）说明书
Botulinus（Types A/B/E/F）Real Time PCR Kit
肉毒杆菌在自然界分布广泛，土壤中常可检出，偶亦存在于动物粪便中。根据所产生毒素的抗原性不同，肉毒杆菌分为A、B、Ca、Cb、D、E、F、G这8个型，能引起人类疾病的有A、B、E、F型，其中以A、B型最为常见。
人体的胃肠道是一个良好的缺氧环境，适于肉毒杆菌居住。肉毒杆菌属于厌氧菌，严格厌氧，在胃肠道内既能分解葡萄糖、麦芽糖及果糖，产酸产气，又能消化分解肉渣，使之变黑，腐败恶臭。在厌氧环境中，此菌能分泌强烈的肉毒毒素，能引起特殊的神经中毒症状，致残率、病死率极高。
肉毒杆菌芽胞抵抗力很强，干热180摄氏度5-15分钟，湿热100摄氏度5小时，高压蒸气121摄氏度30分钟，才能杀死芽胞。肉毒毒素对酸的抵抗力特别强，胃酸溶液24小时内不能将其破坏，故可被胃肠道吸收，损害身心健康。
产品名称
通用名称：肉毒杆菌（A/B/E/F型）核酸测定试剂盒（荧光PCR法）
英文名称：Botulinus（Types A/B/E/F）Real Time PCR Kit
包装规格：25人份/盒
预期用途：对肉毒杆菌的A、B、E、F型特异性DNA核酸片段分别进行荧光检测。
检测原理：本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）结合Taqman技术，对肉毒杆菌A、B、E、F型的特异性DNA核酸片段进行荧光检测。
试剂盒主要组成成份
|
序号 |
组分 |
数量 |
体积/人份 |
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1 |
核酸抽取液 |
1.5ml*2 |
100μl |
|
2 |
A/B型肉毒杆菌核酸荧光PCR检测混合液 |
950μl*1 |
36μl |
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E/F型肉毒杆菌核酸荧光PCR检测混合液 |
950μl*1 |
36μl |
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|
3 |
酶（Taq+UNG） |
22μl*1 |
0.4μl |
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4 |
H₂O |
400μl*1 |
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5 |
阳性对照品 |
60μl*1 |
说明：不同批号的组合不可以互换使用。
存储条件和有效期：试剂盒应在-20℃及以下温度避光保存，有效期12个月。采用冰瓶加冰或者泡沫盒加冰密封进行运输；荧光PCR检测混合液反复冻融不宜超过3次。
适用仪器：P5700,MJ-Option等单色荧光PCR仪；ABI7000,AB7300,ABI7500,ABI7900,LightCycler480,MX3000P,MX3005P,Smart Cycler II,Rotor-Gene3000,iCycler IQ4,iCycler IQ5,CF96,MJ-Opticon2,MJ-chromo4,等多色荧光PCR仪及相应软件。
标本要求
1. 粪便：采集新鲜粪便，取粘液脓血部位标本可立即测试。
2. 血液：采集新鲜抗凝血（非肝素）。
检验方法：
1标本、对照品的核酸裂解处理
（1） 粪便标本：挑取米粒大小粪便（尽可能取粘液脓血部分），于放置有0.5ml生理盐水的离心管中，震荡混均，13,000rpm离心2分钟，去尽上清，沉淀中直接加入100μlDNA提取液充分混匀，沸水浴10分钟（误差不超过1分钟）。13,00rpm离心5分钟，取上清4μl做PCR反应。
（2） 水样标本：取水样3ml，13,000rpm离心2分钟；弃去上清，沉淀中直接加入100μlDNA提取液充分混匀，沸水浴10分钟（误差不超过1分钟）。13,00rpm离心5分钟，取上清4μl做PCR反应。
H₂O为阴性对照。如进行定量检测，阳性对照品需要进行10、100、1000倍梯度稀释。