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小鼠miRNA芯片检测试剂

小鼠miRNA芯片检测试剂

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产品名称: 小鼠miRNA芯片检测试剂

英文名称: Mouse miRNA Array

产品编号: AP-0005

产品价格: 0

产品产地: 美国

品牌商标: Signosis

更新时间: null

使用范围: null

武汉中帜生物科技有限公司
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         人基因组上已明确的miRNA有500多种,同时研究也表明,miRNA的异常表达与癌症有关。常规的基因芯片方法不适宜miRNA的检测,因为miRNA与mRNA不同:(1)miRNA分子量相当小,且丰度差异较大;(2)成熟miRNA与pre-miRNA和pri-miRNA共存,三者具有不同长度;(3)许多miRNA的序列非常相似,例如同型分子的不同亚型,仅有一个或者几个碱基的差异。Signosis基于自有专利技术开发出高通量miRNA芯片检测试剂,一次实验可检测数百种不同miRNA表达,并能区分具有单个碱基差异的miRNA。 

 

A.产品优势

分辨力强——能分辨只有单个碱基差异的同源miRNA,包括let7同源miRNA,以及前体miRNA和成熟miRNA;
线性扩增——捕获的miRNA经T7线性扩增,避免了PCR扩增引入的偏差;
无需预纯化——总RNA可以直接进行分析,无需预纯化;
操作简单——实验步骤简单;
自有专利——基于自有专利T7-OLA(寡核酸连接法)扩增技术开发。
 
 

B.技术原理

          miRNA分子与两条寡核苷酸(oligo)连接,形成RNA/DNA杂合体。含有生物素(biotin,B)的短序列互补结合到其中的一个oligo上。通过结合有链霉亲和素(Streptavidin)的磁珠分离出杂合体。用DNA连接酶连接两条oligo。单个核苷酸的差异就会阻止杂合体的形成或两条oligo的连接。随后,经过T7线性扩增(转录),生物素标记的UTP整合到RNA序列中。把转录好的RNA和膜上的Tag互补序列进行杂交。最后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素及底物进行miRNA表达水平的检测。

C.原理图

 

D.结果展示

 
用肿瘤miRNA芯片检测试剂分别分析HepG2,293和HeLa细胞中132种肿瘤相关miRNA的表达情况及表达差异。
 

小鼠miRNA芯片检测试剂(119 miRNAs AP-0005

 

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