本品是通过基因重组技术克隆表达的缺失突变型RNase的M-MLV反转录酶。一般野生型的M-MLV具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性；依赖于DNA的DNA聚合酶活性；RNase H-活性。由于RNase H-能催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本品M-MLV(RNase H-)的RNase H-活性缺失，延伸能力强，可用于较长cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。 使用M-MLV反转录酶进行1st-cDNA的合成 1. 在Microtube管中配置下列模板RNA/引物混合液,全量6µl 试剂 使用量 模板RNA 1 ng-1 µg Oligo（dT）18 Primer（50µM） 或Random Primers（25µM） 或Specific Primer（10µM） 1 µL RNase free ddH2O Up to 6 µL 注：Total RNA的使用量一般为1 ng-1 µg；mRNA的使用量一般为10 pg-1 µg 2. 70oC保温10 min后迅速在冰上急冷2分钟以上。 3. 离心数秒使模板RNA/引物的变性溶液聚集于Microtube管底部。 4. 在上述Microtube管中配置下列反转录反应液。 试剂 使用量 上述模板RNA/引物变性溶液 6 µL 5×RT Buffer 2 µL dNTP Mixture（各10 mM） 0.5 µL RNase Inhibitor（40 U/µl） 0.25 µL RTase M-MLV(RNase)(200 U/µl) 0.25 µL-1 µL RNase free ddH2O Up to 10 µL 5. 42oC保温1小时 以Random Primers作为反转录引物时先进行30oC, 10 min反应，再在42oC条件保温1小时。 6. 70oC保温15分钟后冰上冷却。得到的cDNA溶液可直接用于2nd-Strand cDNA的合成或PCR扩增。