辣根过氧化物酶，偶联级

产品及特点

HRP 是一种分子量达44 000 的糖蛋白，由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成，中性糖和氨基糖约占18％，主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP 分子中含一个氯化血红素IX 作辅基，该辅基在403nm 波长处有最大吸收峰，而去辅基的酶蛋白在275nm 波长处有最大吸收。HRP 在403nm 的OD值与275nm 的OD 值之比，也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl) 值。RZ 值仅说明血红素基团在HRP 中的含量，并非表示HRP 制剂的真正纯度，而且RZ 值高的HRP 制剂，并不意味着酶活性也高。但可以以纯酶溶液在10mm 光径403nm 波长下的吸光度来计算酶浓度[1％ (W/V) 酶溶液吸光度为22.5，浓度为227umol/L]。HRP 对热及有机溶剂的作用比较稳定，用甲苯与石蜡切片处理或用纯乙醇或l0％甲醛水溶液固定做冷冻切片，均不能使其活性改变。*化物或硫化物在10–5 ～ 10–6mol/L 浓度时具有可逆性地抑制HRP 的作用；氟化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10-3mol ／ L 浓度时抑制HRP；HRP 还可被羟甲基过氧化氢不可逆地抑制。强酸也是HRP 的强烈的抑制剂。HRP 是迄今为止应用最为广泛的标记用酶之一，其主要特点是

1. 易于提取，价格相对低廉。

2. 性质稳定，耐热及有机溶剂的作用，与抗原或抗体偶联后，活性很少受损失。